1、按照培养少突胶质细胞的方法，待10d后细胞分层生长。显微镜下可见满视野圆形、折光性强的小胶质细胞，附着在贴壁生长、紧密连接在一起、铺满培养瓶的星形胶质细胞层上面，甚至可见许多圆形小胶质细胞飘落在培养液中，此时可以开始纯化。

　　2、将培养瓶固定到37℃恒温摇床上，80-200r/min,振摇2h左右。

　　3、收集振摇下来的小胶质细胞，种植到多聚赖氨酸包被的培养皿中，加入新的含10%胎牛血清的DMEM培养基继续培养，每2-3d换液1次。

　　4、小胶质细胞在体外较难进一步分裂增殖，但如果根据实验需要传代培养，一种方法可以直接用细胞刮子刮下细胞，接种到新的培养皿中；另一种方法就是用0.25%胰酶+0.04%的EDTA消化后，进行传代。此方法获得的小胶质细胞，纯度可达90%-95%以上，可以用小胶质细胞特异性标志物F4/80、IBA1和IB4等进行免疫细胞化学染色进行鉴定。相差显微镜下观察，静息状态的小胶质细胞形态呈短小杆状或细长梭形等形态，带有2个或以上突起，折光性强，但是在激活和发挥吞噬功能状态下，小胶质细胞形态可发生巨大变化，胞体变大、变长或者变圆。