传代培养是细胞培养常规保种方法，也是几乎所有细胞生物学实验的基础。当细胞在培养瓶中长满后就需要将其稀释，分种成多瓶，细胞才能继续生长。这一过程就叫传代。传代培养可获得大量细胞供实验所需。传代要在严格的无菌条件下进行，每一步都需要认真仔细的无菌操作。悬浮型细胞直接分瓶就可以，而贴壁细胞需经消化后才能分瓶。

　　一般认为，培养的原代的第1代细胞和传代到第10代以内的细胞统称为原代细胞培养。在人工条件下使其原代细胞生存、生长、繁殖和传代，进行细胞生命过程、细胞癌变、细胞工程等问题的研究。

　　那么关于原代细胞的传代培养，我们应该怎么做呢?一般有以下两种方法：

　　一、贴壁细胞的消化法传代

　　1、吸除或倒掉瓶内旧培养液。

　　2、加入1ml左右消化液(胰蛋白酶或与EDTA混合液)轻轻摇动培养瓶，使瓶底细胞都浸入溶液中。

　　3、消化2-5分钟后把培养瓶放置在显微镜下进行观察，发现原贴壁的细胞逐渐趋于圆形，在还未漂起时，弃去消化液，加入培养液终止消化。

　　4、用吸管将贴壁的细胞吹打成悬液，分别接种到另外两到三个培养瓶中，置37℃培养箱中继续培养。第二天观察贴壁生长情况。

　　二、悬浮细胞的传代

　　1、直接传代

　　① 让悬浮细胞慢慢沉淀在瓶底后，将上清吸掉1/2-2/3。

　　② 用吸管吹打形成细胞悬液后，分别接种到另外两到三个培养瓶中，置37℃培养箱中培养。

　　2、离心法传代

　　① 将细胞连同培养液一并转移到离心管内，离心800-1000rpm，5分钟。

　　② 去除上清，加新的培养液到离心管内，用吸管吹打使之形成细胞悬液。

　　③ 将细胞悬液分别接种到另外两到三个培养瓶中，置37℃培养箱中培养。